大蛇丸向团藏提出了重新开始对千手柱间细胞的研究，然而团藏却出乎预料的拒绝了大蛇丸的提议。
这让大蛇丸非常的惊讶。
当初柱间细胞移植试验被三代目火影终止之后，大蛇丸依旧和团藏保持着密切合作，秘密的进行着柱间细胞移植试验。
团藏帮大蛇丸带来实验品，最后甚至带来了木叶周边村落的六十名婴儿。
大蛇丸从初代火影的尸体中提取出遗传基因，然后把遗传基因注入六十个婴儿的身体中进行人体实验，但排斥反应很强烈，相继死去。
本来大蛇丸还想继续试验下去，但是却被团藏喊了停。
因为失踪的忍者和周边村落失踪的婴儿，已经引起了猿飞日斩的警觉。
只是大蛇丸不知道的是，当初那六十个试验体婴儿，有一个存活了下来，被团藏秘密带入了根部，并成为忍者，代号为‘甲’。
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